適用製品
外来ＤＮＡをゲノムＤＮＡ中の複数の部位に挿入する方法
目的
多数の遺伝子群、又は多コピー数の遺伝子を一括してゲノムDNA中に挿入することができる、有用な遺伝子導入法を提供する。
効果
CRISP等のゲノム編集技術及びトランスポゾン等の、ゲノム中に２コピー以上点在する200ｂｐ以上のヌクレオチド配列へ挿入用のＤＮＡ断片をもつプラスミドを併用すれば、多くの生物種において本発明の方法を実施することができる。
技術概要
２コピー以上点在する、200ｂｐ以上のヌクレオチド配列を含むゲノム二本鎖DNAを有する宿主細胞内において、
該ゲノム二本鎖DNA、並びに
該200ｂｐ以上のヌクレオチド配列又はその部分配列と相同なヌクレオチド配列、及び外来DNA配列を含むドナーDNAを、
該200ｂｐ以上のヌクレオチド配列中の選択された標的ヌクレオチド配列と特異的に結合し、該標的ヌクレオチド配列内でDNAを切断するヌクレアーゼと接触し、
該ゲノム二本鎖DNA上の該200ｂｐ以上のヌクレオチド配列と該ドナーDNAに含まれる該200ｂｐ以上のヌクレオチド配列又はその部分配列と相同なヌクレオチド配列との間で相同組換えを生じさせることにより、該外来DNA配列を、ゲノム二本鎖DNAに含まれる２コピー以上の該200ｂｐ以上のヌクレオチド配列に挿入することを含み、
該相同なヌクレオチド配列は、該標的ヌクレオチド配列を含み、該標的ヌクレオチド配列内でDNAを切断した場合、該200ｂｐ以上のヌクレオチド配列を含むゲノムDNAに対して、相同組換えを生じるのに十分な程度の配列同一性及び長さを有し、
該200ｂｐ以上のヌクレオチド配列が、トランスポゾン配列であり、
トランスポゾンがレトロトランスポゾンである、方法。
基本情報
開放特許情報
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登録者情報
その他の情報
