適用製品
無細胞タンパク質合成系を用いた膜タンパク質の製造方法
目的
脂質ディスク又はリポソーム内で天然構造又は活性構造に折りたたまれた膜タンパク質の製造方法を提供する。
効果
脂質ディスクが融合する際に合成されたタンパク質のフォールド形成が促進され、正常なフォールドをもつ膜タンパク質が効率よく合成できる。従って、多くの膜タンパク質に汎用的に用いることができ、膜タンパク質の大量調製法としても有用である。
技術概要
脂質ディスク又はリポソーム内で天然構造又は活性構造に折りたたまれた膜タンパク質の製造方法であって、
（ａ）膜タンパク質をコードするポリヌクレオチドと、ステロイド性界面活性剤と、リン脂質と、を含む無細胞タンパク質合成反応液を調製する工程、ここで、前記ステロイド性界面活性剤は、コール酸又はＣＨＡＰＳであり、前記ステロイド性界面活性剤は、前記反応液中に臨界ミセル濃度の１．５〜１０倍の初期濃度で含まれ、
（ｂ）前記反応液の界面活性剤濃度を低下させる工程、及び
（ｃ）前記膜タンパク質を透析法を用いた無細胞タンパク質合成反応により前記界面活性剤濃度の低下に従って合成すると共に、合成された膜タンパク質を組み込んだ脂質ディスク又はリポソームを形成させる工程、
を含むことを特徴とする膜タンパク質の製造方法。
基本情報
開放特許情報
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登録者情報
その他の情報
