適用製品
IV型コラーゲンの三量体形成能を評価する方法、化合物をスクリーニングする方法、化合物の効果を評価する方法およびこれらの方法に使用するためのキット
目的
IV型コラーゲンの三量体形成能を評価する方法、IV型コラーゲンの三量体形成能を促進する化合物をスクリーニングする方法、IV型コラーゲン三量体形成能を促進する化合物の効果を評価する方法、およびこれらの方法に使用するためのキットを提供する。
効果
定量性があり、再現性の高い方法である。さらには、ハイスループットスクリーニングへの応用も可能であるため、IV型コラーゲンの三量体形成能を促進する化合物をスクリーニングするために利用することができる。また、本発明の方法は、IV型コラーゲン三量体形成能を促進する化合物の効果を評価するために用いることもできる。
技術概要
IV型コラーゲンの三量体形成能を評価する方法であって、
(1)以下(a)ー(c)の融合タンパク質:
(a)野生型または変異型のIV型コラーゲンα3(IV)鎖とスプリット型ルシフェラーゼの一方を含む融合タンパク質;
(b)野生型または変異型のIV型コラーゲンα4(IV)鎖とペプチドタグを含む融合タンパク質;および
(c)野生型または変異型のIV型コラーゲンα5(IV)鎖とスプリット型ルシフェラーゼの他方を含む融合タンパク質;
を共発現する細胞を培養し;
(2)(1)の培養物に発光基質を加えてインキュベートし;そして
(3)発光強度に応じてIV型コラーゲンの三量体形成能を評価する;
ことを含む、前記方法。