目的
制限酵素で切断されたゲノムＤＮＡとオリゴＤＮＡアダプターを用い、少ない工程と簡単な構成からなり、かつ精度の高い未知配列の増幅を可能にする、ＤＮＡ断片の製造方法を提供すること。
効果
種々の生物のゲノム上に存在する既知配列から、未知の配列を効率よく、しかも簡便に単離することが可能となる。これにより、新しい遺伝子の全長決定、遺伝子の上下流に位置する調節配列の探索、くり返しモチーフなど遺伝子をコードしない領域の探索など、これまで困難であった未知領域の塩基配列の解析が容易になると期待される。
技術概要
被検細胞のゲノムＤＮＡから、既知配列からなるオリゴＤＮＡアダプターを結合したＤＮＡ断片を製造する方法であって、下記工程を含むことを特徴とする、アダプター結合ＤＮＡ断片製造方法。
（１）ゲノムＤＮＡを、５’突出末端を形成する制限酵素で切断し、制限酵素断片を得る工程
（２）前記制限酵素が形成する突出末端と相補的な塩基配列を有する突出末端を持ち、更にその突出先端に前記制限酵素断片の切欠き部に存在する塩基と同一種の塩基が１つ付加され、該塩基がリン酸化された１組の２本鎖オリゴＤＮＡからなるアダプターを、ＤＮＡリガーゼを用いて工程（１）で得られた制限酵素断片に結合させる工程
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