適用製品
ｉＰＳ細胞からの効果的な分化誘導等を目的とする複数の外来遺伝子を胚様体に発現させる方法、該方法で製造する胚様体
目的
複数の外来遺伝子並びに薬剤選択マーカー及び／又はレポーター遺伝子のｉＰＳ細胞への効果的なトランスフェクション方法と、該方法によって製造される前記外来遺伝子を１００％発現する胚様体の形成方法と、該方法によって製造された胚様体の提供。
効果
薬剤選択マーカー及び／又はレポーター遺伝子の発現を指標に、目的とする外来遺伝子を有するｉＰＳ細胞を効率的に選択し、前記複数の遺伝子を１００％の割合で発現するｉＰＳ細胞の増殖凝集体である胚様体を簡便な操作で短期間に高い効率で形成させることができる。この外来遺伝子が導入されたｉＰＳ細胞からなる胚様体は、さらに増殖し、分化誘導させることにより、例えば、患者毎に移植可能な又は創薬研究に応用可能な肝細胞若しくは筋細胞又はそれらの前駆細胞等の体細胞様細胞を簡便な操作で、短期間に大量に製造することが可能である。
技術概要
本発明は、ヒト人工多能性幹細胞（ｉＰＳ細胞）から成る胚様体に複数の外来遺伝子を発現させる方法であって、
１）エピソーマルベクターを用いて、ｉＰＳ細胞に該外来遺伝子を非リポソーム型カチオン性脂質トランスフェクション試薬を用いてトランスフェクションする工程、
２）該外来遺伝子がトランスフェクションされたｉＰＳ細胞を、薬剤選択マーカー及び／又はレポーター遺伝子を用いて選別する工程、
３）選別されたｉＰＳ細胞を、非静的な培養方法で培養し、胚様体まで増殖させる工程
を含む方法を提供する。
基本情報
開放特許情報
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登録者情報
その他の情報
