適用製品
非天然タンパク質製造用の組換え細菌の作製方法
目的
細菌の翻訳終結因子をコードする遺伝子を欠損させる場合に好適に適用し得る、非天然タンパク質製造用の組換え細菌を作製するための新規な方法を提供する。
効果
本発明によれば、細菌の翻訳終結因子をコードする遺伝子欠損させる場合においても、非天然タンパク質製造用の組換え細菌を容易に作製することができる。そのため、所望の細菌又は大腸菌を用いた非天然タンパク質の製造効率を容易に向上させることができる。
技術概要
非天然タンパク質製造用の組換え細菌の作製方法であって、
（１）ＵＡＧコドンを認識するｔＲＮＡを細菌内に発現させるステップと、
（２）前記ｔＲＮＡを非天然型アミノ酸又はα−ヒドロキシ酸によってアシル化するアミノアシル−ｔＲＮＡ合成酵素を細菌内に発現させるステップと、
（３）ＵＡＧコドンで翻訳を終結する翻訳終結因子をコードする遺伝子の欠損によって機能を喪失する遺伝子の群から選択される１以上の遺伝子の機能を、前記翻訳終結因子の非存在下において発現させるための処理を細菌に対して行うステップと、
（４）細菌内の前記翻訳終結因子をコードする遺伝子を欠損させるステップと、
を含み、
前記（１）〜（４）のステップにおける前記各細菌は全て同一の細菌であり、
前記処理が、前記１以上の遺伝子の機能を前記翻訳終結因子の非存在下において発現させるＤＮＡ構築物を前記細菌に導入する処理及び／又は前記細菌の染色体上の前記１以上の遺伝子に、当該遺伝子の機能を前記翻訳終結因子の非存在下において発現させるための改変を導入する処理である、作製方法。
基本情報
開放特許情報
)
登録者情報
その他の情報
