目的
放線菌ロドコッカス・エリスロポリスのイソクエン酸リアーゼ遺伝子の５’−非翻訳領域から構成型の転写プロモーター活性領域を特定し、このプロモーター活性を利用した遺伝子発現系構築の方法を提供する。
効果
このプロモーターを使用する事で、タンパク質の恒常的な高生産が期待できる他、異なる転写活性を持つＰｎｉｔやＰｔｉｐと組み合わせることで生体触媒を使用した効率よい物質変換システムを構築出来る。
技術概要
放線菌より単離した誘導基質を必要としない構成型プロモーターを単離し、そのプロモーター遺伝子を含む組換えＤＮＡベクター、ベクターにより形質転換された宿主細胞によりポリペプチドを産生させる方法である。（ａ）配列番号１で示す塩基配列からなるＤＮＡ、（ｂ）配列番号１で示す塩基配列に相補的な塩基配列からなるＤＮＡとストリンジェントな条件下でハイブリダイズし、かつプロモーター活性を有するＤＮＡ、及び（ｃ）配列番号１で示す塩基配列において、１又は数個の塩基が欠失、置換又は付加された塩基配列からなり、かつプロモーター活性を有するＤＮＡからなるプロモーターである。ロドコッカス属細菌のイソクエン酸リアーゼをコードする遺伝子の開始コドンより上流非翻訳領域の一部からなり、基質による誘導を必要としない構成型プロモーターである。このプロモーターの下流に発現標的遺伝子を連結させた、遺伝子の発現カセットである。この発現ベクター又は発現カセットを含む形質転換体である。宿主はコリネバクテリウム亜目に分類される微生物である。
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