適用製品
動物組織透過性、生体内における分子現象、蛋白質の構造変化、リン酸化、蛋白質−蛋白質間の相互作用、２次信号伝達物質の産生、生命現象、分子メカニズム
目的
レポータージーンアッセイ又はツーハイブリットアッセイ等のレポーター遺伝子を用いた各種アッセイ法におけるリガンド刺激時間を短縮する改良方法の提供を目的とするものであり、具体的には、レポーター遺伝子として、より高輝度で安定な生物発光及び／又は長波長側にシフトした生物発光を呈するルシフェラーゼを発現する遺伝子改変体の利用法の提供の実現。
効果
従来のレポータージーンアッセイ法、ツーハイブリッド法などレポーター遺伝子を用いる分析システムにおいて、海洋動物由来の発光酵素の高輝度改変体遺伝子をレポーター遺伝子として用いることで、大幅にアッセイ時間を短縮できる。また、各アッセイシステムにおいて、感度が良く定量的な計測が簡便に行える。このことは、細胞内又は細胞小器官レベルでの分子現象を短時間で観察するツールにもなり得ることを期待させるものでもある。
技術概要
この技術は、外部刺激に応じた細胞内での標的遺伝子発現の時期又は発現量を解析するための分析法に用いるレポーター遺伝子であって、海洋動物発光酵素のアミノ酸配列において、ガウシアルシフェラーゼ（ＧＬｕｃ）のアミノ酸配列上の８９〜１１８位までに相当する位置のアミノ酸残基のうち少なくとも１残基が置換されており、置換が、同８９位、９０位、９５位、９７位、１００位、１０８位、１１２位、１１５位、及び１１８位に相当する位置の少なくとも１つから選ばれた位置のアミノ酸残基に対して同類アミノ酸置換（ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ）であり、それによって発光機能が向上した変異発光酵素をコードする遺伝子からなる、レポーター遺伝子である。「海洋動物発光酵素」というとき、ガウシア、ウミシイタケ、ウミホタル、カイシアなどと共に、発光プランクトンの仲間であるオベリン、アクアリン、Ｐｌｅｕｒｏｍａｎｍａ、Ｏｐｌｏｐｈｏｒｕｓ等も含まれ、これらの「発光性の海洋動物」が産生する発光酵素（ルシフェラーゼ）を指す。
基本情報
開放特許情報
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登録者情報
その他の情報