適用製品
細胞生物学分野、基礎医学分野、解析試薬、NOの代謝異常が関連する疾患の診断薬。
目的
8−チオアルコキシグアノシンー3’,5’−サイクリック1リン酸(S−グアニル化構造)を特異的に認識する抗体の提供。さらに、この構造を特異的に認識する抗体を作製することにより、生体試料中に生成したS−グアニル化構造を、免疫学的手法(免疫染色やELISA法)によって簡便に分析する方法の提供。
効果
これまでその生体内生成が不明であった8−チオアルコキシグアノシンー3’5’−サイクリック1リン酸構造の生成が、簡便に解析できるようになる。さらに、この抗体を用いて、細胞内におけるS−グアニル化の役割を解析し、多彩なNOの生理作用を解明することが可能になる。
技術概要
この技術は、有機合成した8−nitro−cGMPを、還元剤にて変性させたウシ血清アルブミンのSH基に反応させて、分子内に8−チオアルコキシグアノシン−3’5’−サイクリック1リン酸構造を導入した。次に、これを免疫原として、ウサギおよびマウスに接種した。採血し得られた血清を、まず変性ウシ血清アルブミン結合カラムにて、非特異的な抗体成分を除去した後、プロテインAカラムを用いて、イムノグロブリンG分画を精製した。競合ELISA法により、本抗体は、8−チオアルコキシグアノシンー3’,5’−サイクリック1リン酸構造に特異的に反応することを確認した。また、本抗体は、Western blot法ならびに免疫細胞化学法に応用可能であることを確認した。この技術はこれらの知見に基づいて完成したものである。即ち、8−チオアルコキシグアノシンー3’,5’−サイクリック1リン酸を特異的に認識する抗体である。